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CRISPR那些事儿
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FAQ
如何选择合适的细胞进行文库筛选？
细胞选择可以遵循以下原则：
1）与研究目的相符
2）sgRNA文库靶向的基因要与细胞的属源相符
3）细胞可以稳定传代
4）转染效率高
尽量不选用原代细胞。由于原代细胞无法稳定传代，可能在文库筛选实验的过程中，原代细胞已经出现大量死亡，无法完成实验。如果选用原代细胞进行文库筛选，为分析决上述的风险，可以顺利获得降低细胞覆盖度和选择gRNA数较小的文库进行筛选，尽可能降低文库细胞池的数量和缩短实验周期。
1）与研究目的相符
2）sgRNA文库靶向的基因要与细胞的属源相符
3）细胞可以稳定传代
4）转染效率高
尽量不选用原代细胞。由于原代细胞无法稳定传代，可能在文库筛选实验的过程中，原代细胞已经出现大量死亡，无法完成实验。如果选用原代细胞进行文库筛选，为分析决上述的风险，可以顺利获得降低细胞覆盖度和选择gRNA数较小的文库进行筛选，尽可能降低文库细胞池的数量和缩短实验周期。
什么是慢病毒包装？
慢病毒是一种将外源基因导入细胞的基因递送工具。顺利获得如293T等工具细胞，将带有目标DNA片段的慢病毒载体包装成具有细胞感染活性的慢病毒颗粒。这个包装过程包括：构建慢病毒载体、准备包装质粒、工具细胞培养、质粒转染、收集病毒颗粒、病毒颗粒纯化和浓缩和滴度测定等过程。
能否检测未知新基因？
现在玉米蛇无详细的参考基因组数据，球盟会生物基因现在只提供已知基因检测服务。
检测需要提供什么样品？
现在建议提供蜕化的蛇皮即可检测。
检测准确率如何？
依托球盟会生物基因实验室，采用双盲复核机制，第三方公司测序验证，准确率>99.9%。
什么是KO细胞系？
KO细胞系（Knockout Cell Line）是顺利获得基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）敲除或删除特定基因的细胞系。这意味着目标基因被完全移除或失去功能，使研究人员能够观察该基因缺失对细胞行为和生物学过程的影响。这种细胞系在生物医学研究中非常重要，因为它们提供了直接分析基因功能和疾病机制的实验工具。
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